• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Hujayra jami RNK izolyatsiyasi to'plami Hujayradan jami RNK izolatsiyasini tozalash to'plamlari

To'plam tavsifi:

Har xil ekilgan hujayralardan yuqori darajada tozalangan va sifatli umumiy RNKni 11 daqiqada olish mumkin.

RNazsiz

Xona haroratida ishlaydi (15-25 ℃)

DNKni tozalash ustuni bilan

Yuqori RNK rentabelligi

Tez: 11 daqiqada ekstraktsiyani tugating

Xavfsizlik: yo'q organik kimyoviy

oldingi kuch


  • :
  • Mahsulot detali

    Mahsulot teglari

    TSS

    Tavsif

    Ushbu to'plam 96, 24, 12 va 6 quduqli plastinkalarda o'stirilgan hujayralardan yuqori toza va yuqori sifatli umumiy RNKni samarali ajratib olishi mumkin bo'lgan Foregene tomonidan ishlab chiqilgan spin ustuni va formulasidan foydalanadi.

    To'plam supernatant va hujayra lizatini osongina ajratib turadigan, genomik DNKni bog'laydigan va olib tashlaydigan samarali DNK-tozalash ustunini ta'minlaydi.Operatsiya oddiy va vaqtni tejaydi.

    Tu faqat RNK ustuni RNKni noyob formula bilan samarali bog'lashi mumkin.Ko'p sonli namunalarni bir vaqtning o'zida qayta ishlash mumkin.

    To'plam komponentlari

    To'plam tarkibi RE-03111 RE-03114
    50 T 200 T
    Bufer cRL1* 25 ml 100 ml
    Bufer cRL2 15 ml 60 ml
    Bufer RW1* 25 ml 100 ml
    Bufer RW2 24 ml 96 ml
    RNazsiz ddH2O 10 ml 40 ml
    Faqat RNK ustuni 50 200
    DNKni tozalash ustuni 50 200
    Ko'rsatma 1 1

    *Iltimos, ish paytida qo'lqop kiying va himoya choralarini ko'ring, chunki Bufer cRL1 va Bufer RW1 tirnash xususiyati beruvchi xaotrop tuzlarni o'z ichiga oladi.

    Xususiyatlari va afzalliklari

    ■ Butun jarayon xona haroratida (15-25 ℃), muzli hammomsiz va past haroratli santrifüjsiz ishlaydi.
    ■ Butun to'plam RNase-Free, RNK degradatsiyasi haqida tashvishlanishga hojat yo'q.
    ■ DNKni tozalash ustuni DNKni maxsus bog'laydi, shuning uchun to'plam qo'shimcha DNase qo'shmasdan genomik DNK ifloslanishini olib tashlashi mumkin.
    ■ Yuqori RNK rentabelligi: faqat RNK ustuni va noyob formulasi RNKni samarali tozalashi mumkin.
    ■ Tez tezlik: ishlatish oson va 11 daqiqada bajarilishi mumkin.
    ■ Xavfsizlik: hech qanday organik reagent talab qilinmaydi.
    ■ Yuqori sifat: Tozalangan RNK yuqori toza, oqsil va boshqa aralashmalardan xoli bo'lib, turli keyingi tajribalarga javob berishi mumkin.

    foregene RNK izolyatsiyasi to'plamining afzalliklari

    Kit ilovasi

    U 96, 24, 12 va 6-quduqli plitalardagi madaniyatli hujayralardan umumiy RNKni ajratib olish va tozalash uchun javob beradi.

    Ish oqimi

    hujayra umumiy RNK

    Diagramma

    Hujayra umumiy RNK izolyatsiyasi to'plami ish oqimi1

    Hujayraning umumiy RNK izolyatsiyasi to'plamining agaroz jel batareyasi diagrammasi yuqorida ko'rsatilgan turli xil hujayralar soniga ishlov berdi, 20 mkl hajmli elyusiya, 2 mkl tozalangan umumiy RNK 1% ni oling.

    Saqlash va saqlash muddati

    To'plam xona haroratida (15-25 ℃) 12 oy yoki uzoqroq (24 oy) 2-8 ℃ haroratda saqlanishi mumkin.

    Bufer cRL1 2-gidroksi-1-etantiol (ixtiyoriy) qo'shilgandan keyin 1 oy davomida 4 ℃ da saqlanishi mumkin.


  • Oldingi:
  • Keyingisi:

  • RNK olinmaydi yoki RNK hosildorligi past bo'ladi

    Ko'pincha tiklanish samaradorligiga turli xil omillar ta'sir qiladi, masalan: to'qima namunasidagi RNK tarkibi, ishlash usuli, elutsiya hajmi va boshqalar.

    1. Muzli hammom yoki kriyojenik (4 ° C) santrifüj operatsiya davomida amalga oshirildi.

    Tavsiya: Butun jarayon davomida xona haroratida (15-25 ° C) ishlang, muzli hammom va past haroratlarda santrifüj qilmang.

    2. Namunani noto'g'ri saqlash yoki ortiqcha namunani saqlash muddati.

    Tavsiya: Namunalarni -80 °C haroratda saqlang yoki suyuq azotda muzlatib qo'ying va qayta-qayta muzlatish-eritishdan saqlaning;RNK ekstraktsiyasi uchun yangi to'qima yoki madaniyatli hujayralardan foydalanishga harakat qiling.

    3. Namuna lizisining etarli emasligi.

    Tavsiya: To'qimalarni homogenlashtirganda, to'qimalarning etarlicha homogenlanganligiga ishonch hosil qiling va to'qima hujayralari RNKning chiqarilishini tushuntirish uchun etarli darajada bo'linadi.

    4. Eluent to'g'ri qo'shilmagan.

    Tavsiya: RNase-Free ddH ekanligini tasdiqlang2O tozalash kolonnasi membranasining o'rtasiga tomchilab qo'shiladi.

    5. Bufer RL2 yoki RW2 tamponiga mutlaq etanolning to'g'ri hajmi qo'shilmagan.

    Tavsiya: Ko'rsatmalarga rioya qiling, to'plamni ishlatishdan oldin bufer RL2 va bufer RW2 ga to'g'ri miqdorda mutlaq etanol qo'shing va yaxshilab aralashtiring.

    6. To'qima namunasi dozasi mos emas.

    Tavsiya: 10-20 mg to'qima yoki (1-5) × 10 dan foydalaning6500 mkl boshiga hujayralar RL1 buferi, chunki ortiqcha to'qimalardan foydalanish RNK ​​ekstraktsiyasini kamaytirishga olib kelishi mumkin.

    7. Noto'g'ri elyusiya hajmi yoki to'liq emas.

    Tavsiya: Tozalash ustunining elutsiya hajmi 50-200 mkl;agar elüsyon effekti qoniqarli bo'lmasa, oldindan qizdirilgan RNase-Free ddH qo'shgandan keyin xona haroratini joylashtirish vaqtini uzaytirish tavsiya etiladi.2O, masalan, 5-10 daqiqa.

    8.Bufer RW2 yuvishdan keyin tozalash ustunida etanol qoldig'i bor.

    Tavsiya: Bufer RW2 yuvilganidan keyin etanol qoldig'i bo'lsa, 1 minut davomida bo'sh trubkani santrifüjlash, bo'sh trubkani santrifüj qilish uchun vaqtni 2 daqiqaga oshirish mumkin yoki qoldiq etanolni etarli darajada olib tashlash uchun tozalash ustunini xona haroratida 5 daqiqaga qo'yish mumkin.

    Tozalangan RNK parchalanadi

    Tozalangan RNKning sifati namunaning saqlanishi, RNazning ifloslanishi va manipulyatsiyasi va boshqalar kabi omillarga bog'liq.

    1. To'qimalar namunalari o'z vaqtida saqlanmaydi.

    Tavsiya: Agar to'qima namunalari yoki hujayralar yig'ilgandan keyin o'z vaqtida ishlatilmasa, darhol -80 ° C yoki suyuq azotda krioservalash.RNKni ajratib olish uchun iloji boricha yangi olingan to'qima yoki hujayra namunasidan foydalaning.

    2. To'qimalar namunalarini qayta-qayta muzlatish-eritish.

    Tavsiya: Toʻqima namunalarini saqlashda ularni saqlash uchun kichik boʻlaklarga boʻlib kesib, namunani qayta-qayta muzlatish va RNK degradatsiyasiga yoʻl qoʻymaslik uchun ulardan foydalanganda ulardan birini olib tashlash yaxshidir.

    3. RNase kiritiladi yoki operatsiya davomida bir martalik qo'lqoplar, niqoblar va boshqalar kiymaydi.

    Tavsiya: RNKni ekstraksiyalash tajribalari eng yaxshisi alohida RNK manipulyatsiyasi xonalarida amalga oshiriladi va tajribadan oldin jadval tozalanadi.

    Tajriba davomida RNazning kiritilishi natijasida kelib chiqqan RNK degradatsiyasini minimallashtirish uchun bir martalik qo'lqop va niqob kiying.

    4. Reaktivlar foydalanish vaqtida RNase bilan ifloslangan.

    Tavsiya: Tegishli tajribalar uchun yangi Hayvonlarning umumiy RNK izolyatsiyasi to'plami bilan almashtiring.

    5. RNK manipulyatsiyasida ishlatiladigan sentrifuga naychalari, uchlari va boshqalar RNase bilan ifloslangan.

    Tavsiya: RNK ekstraktsiyasida ishlatiladigan santrifüj naychalari, uchlari, pipetkalari va boshqalarning barchasi RNazsiz ekanligini tasdiqlang.

    Tozalangan olingan RNK quyi oqim tajribalariga ta'sir qiladi

    Tozalash ustuni bilan tozalangan RNK, agar tuz ionlari, oqsil miqdori juda katta bo'lsa, quyi oqim tajribasiga ta'sir qiladi, masalan: teskari transkripsiya, Northern Blot va boshqalar.

    1. Elutsiya qilingan RNK tuz ioni qoldiqlariga ega.

    Tavsiya: RW2 tamponiga etanolning to'g'ri hajmi qo'shilganligini tasdiqlang va ish uchun ko'rsatilgan markazdan qochma tezlikda 2 ta tozalash ustunini yuving;agar tuz ioni qoldig'i bo'lsa, tozalash ustunini xona haroratida 5 daqiqa davomida RW2 Buferiga qoldiring va tuz ifloslanishini maksimal darajada olib tashlash uchun santrifüj qiling.

    2. Elyusiyalangan RNKdagi etanol qoldig'i.

    Tavsiya: RW2 tamponini yuvgandan so'ng, bo'sh trubkani santrifüjlash operatsiyasini ishlash uchun ko'rsatilgan santrifüjlash tezligida bajarishni tasdiqlang, agar hali etanol qoldig'i bo'lsa, bo'sh trubkani santrifugalash vaqtini 2 minutga oshiring yoki xona haroratida 5 m davomida qoldiring.

    Xabaringizni shu yerga yozing va bizga yuboring