V: Birodar, teskari transkripsiya tugallandi va nihoyat oxirgi bosqich - lyuminestsent miqdoriy PCR!Hey, birodar, real vaqtda miqdoriy PCR nima?
M: PCR siz har doim bilasiz, to'g'rimi?
V: Bilasizmi, PCR bu polimeraza zanjiri reaktsiyasi va bu DNKni oshiradigan texnologiya!
M:Bu deyarli... Bu aniq primerlar orqali maqsadli ketma-ketlikni bir million martadan ortiq oshirishning texnik usuli, ammo bu faqat maqsadli ketma-ketlikning mavjudligi yoki yo'qligini ko'rsatadi va boshlang'ich shablon miqdorini aniqlay olmaydi.Floresan miqdoriy PCR - bu muammoni hal qilish uchun ishlab chiqilgan texnik usul.Haqiqiy vaqtda PCR va miqdor PCR (qPCR) odatda unga ishora qiladi.
W: Oddiy PCRdan farqi floresan miqdorini aniqlashda?
M: Ha, ya'ni har bir PCR siklining kengaytma bosqichida floresans signalining intensivligi aniqlanadi va dastlabki shablon miqdori signal intensivligining o'zgarishiga qarab hisoblanishi mumkin.
V: Bu juda murakkab tuyuladi!Buni o'zim hisoblashim kerakmi?
M: Bu sizdan sekin o'rganishni talab qiladi, eng yaxshisi printsipni tushuna olish.Endi siz birinchi navbatda CT qiymatiga e'tibor qaratishingiz mumkin, bu nisbatan intuitiv eksperimental ma'lumotlar va uning o'lchami dastlabki shablon miqdorining o'lchamiga mos keladi.Bundan tashqari, kuchaytirish egri chiziqlari va erish egri chiziqlari kabi grafiklar mavjud.Tajribangiz muvaffaqiyatli bo'ladimi yoki yo'qmi, ular yakuniy so'zni aytishadi.
W: Oh, uka.Keyin men qPCR tajribasini o'tkazmoqchiman!
M:Reagent maydoniga shablonlarni qo'shmaslikka alohida e'tibor bering, aks holda foydalanilmagan aralashmangiz osongina ifloslanadi!
W: Tushundim!

Real Time PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I to'plami

Yuqori samaradorlik, katta o'ziga xoslik
Yuqori sezuvchanlik, yaxshi moslik