PCRning tug'ilishi
PCR (polimeraza zanjiri reaktsiyasi)
Polimeraza zanjiri reaktsiyasi ixtiro qilinganidan beri 30 yildan ortiq vaqt o'tdi.30 yildan ko'proq vaqt davomida, butun dunyo bo'ylab ko'plab olimlar to'ldirish va takomillashtirishda davom etgandan so'ng, PCR texnologiyasi butun hayot fanlari sohasida eng keng tarqalgan va tez-tez ishlatiladigan va eng muhim asosiy tadqiqot usuliga aylandi.
An'anaviy PCR texnologiyasini keng qo'llash asosida ishlab chiqilgan TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR va boshqalar, shuningdek, yangi paydo bo'lgan Raqamli PCR (raqamli PCR) ko'pchilik ilmiy tadqiqotchilarning tadqiqot usullarini sezilarli darajada boyitdi va zamonaviy hayot fanlari, ayniqsa molekulyar biologiyaning rivojlanish jarayonini sezilarli darajada tezlashtirdi, inson hayoti va butun tabiatini o'rganishga katta hissa qo'shdi.
An'anaviy PCR texnologiyasining kamchiliklari
Murakkab nuklein kislotalarni ajratish vaqazib olish:
★ An'anaviy PCR texnologiyasi: talab qilinadi
★ PCR olingan texnologiya: talab qilinadi
★ DNK va RNK namunalari: katta farqlar, qiyin operatsiya talablari
★ Tana uchun xavfli: zaharli reagentlar tanaga zarar etkazadi
An'anaviy PCR texnologiyasi va lotin texnologiyasi nuklein kislotani ajratish va tozalashning zaruriy shartiga ega.
Har qanday biologik namuna PCR texnologiyasi talablariga javob beradigan nuklein kislota namunalarini olish uchun bir qator murakkab va zerikarli namunalarni qayta ishlashdan o'tishi kerak.
DNK va RNKni ajratish va olish har doim tegishli ilmiy tadqiqotchilar har kuni takrorlashi kerak bo'lgan asosiy vazifa bo'lib kelgan.
Namunalar orasidagi katta farqlar tufayli DNK va RNKni ajratish va ekstraktsiya jarayonlari ham juda farq qiladi.Bu ish operatorlardan yuqori darajadagi texnik malakani talab qiladi.An'anaviy ajratish va ekstraksiya usullari ba'zi yuqori zaharli kimyoviy reagentlar bilan uzoq muddatli aloqani talab qiladi.Bu operatorning tanasiga tuzatib bo'lmaydigan zarar etkazadi va hatto tajriba davomida bevosita zarar etkazadi.
Shu bilan birga, ko'p miqdordagi namunalarga ega bo'lganlar uchun nuklein kislotalarni o'rganish, ajratish va olish juda ko'p mehnat talab qiladigan ishdir.
Bozorda nuklein kislotasi izolyatsiyasi va ekstraktsiya to'plamlari hozirda etuk va ko'plab brendlar mavjud, ammo ular taxminan bir xil.Bu silika jelli membrana ustunli santrifüj to'plami yoki magnit boncuk usuli to'plami bo'ladimi, bu juda ko'p vaqtni oladi va qimmatga tushadi.To'plamning narxidan tashqari, laboratoriya jihozlariga ham maxsus talablar qo'yiladi.Magnit boncuk usulida qo'llaniladigan avtomatlashtirilgan ish stantsiyasi juda tipik keng ko'lamli yuqori qiymatli uskuna bo'lib, bu laboratoriya uchun katta xarajatdir.
qisqa bayoni; yakunida
PCR tajribalarini o'tkazishdan oldin, namunalarni oldindan davolash tadqiqotchilar uchun muqarrar va har doim bosh og'rig'i hisoblanadi.Ushbu muammoni qanday hal qilish va PCR tajribalarini nuklein kislotalarni ajratmasdan va olishsiz amalga oshirish mumkinmi, doimo ilmiy tadqiqotchilar va klinik laboratoriya xodimlarining ko'pchiligining fikri bo'lib kelgan.
Foregene yechimi
To'g'ridan-to'g'ri PCR texnologiyasi va tegishli to'plamlar bo'yicha ko'p yillik mashaqqatli izlanishlardan so'ng, Forgene ko'plab muammolardan muvaffaqiyatli o'tdi va kuchli qarshilik va moslashuvchanlikka ega bo'lgan turli xil namunalarning ko'p turlari uchun to'g'ridan-to'g'ri PCRga muvaffaqiyatli erishdi, bu tadqiqotchilarga nuklein kislotalarning noqulay va xavfli ajratish va ekstraktsiyasidan xalos bo'lish imkonini berdi.Bu har bir kishining mehnat zichligini sezilarli darajada kamaytiradi, tajriba jarayonini tezlashtiradi va ilmiy tadqiqot va sinov xarajatlarini tejaydi.
Forgenning DirectPCR haqidagi tushunchasi va bilimi
Birinchidan, DirectPCR texnologiyasi turli biologik namuna to'qimalari uchun to'g'ridan-to'g'ri PCR texnologiyasidir.Ushbu texnik shartda nuklein kislotalarni ajratish va ajratib olishning hojati yo'q va to'qima namunasi to'g'ridan-to'g'ri ob'ekt sifatida ishlatiladi va PCR reaktsiyasi uchun maqsadli gen primerlari qo'shiladi.
Ikkinchidan, DirectPCR texnologiyasi nafaqat an'anaviy DNK shablonini kuchaytirish texnologiyasi, balki RNK shablonini teskari transkripsiyali PCRni ham o'z ichiga oladi.
Uchinchidan, DirectPCR texnologiyasi nafaqat to'qimalar namunalarida muntazam sifatli PCR reaktsiyalarini amalga oshiradi, balki Real-Time qPCR reaktsiyalarini ham o'z ichiga oladi, bu reaktsiya tizimi fon floresans shovqiniga qarshi turish va endogen floresan o'chiruvchilarga qarshi turish qobiliyatiga ega bo'lishini talab qiladi.
To'rtinchidan, DirectPCR texnologiyasiga mo'ljallangan to'qimalar namunalari faqat nuklein kislota shablonlarini chiqarishni talab qiladi va PCR reaktsiyasiga xalaqit beradigan oqsillarni, polisakkaridlarni, tuz ionlarini va boshqalarni olib tashlamaydi.Buning uchun reaktsiya tizimidagi nuklein kislota polimeraza va PCR aralashmasi mukammal anti-qaytarilish va moslashuvchanlikka ega bo'lishini talab qiladi va murakkab sharoitlarda ferment faolligi va replikatsiya aniqligini ta'minlaydi.
Beshinchidan, DirectPCR texnologiyasiga mo'ljallangan to'qimalar namunalari nuklein kislota bilan boyitish bilan ishlov berilmagan va shablon miqdori juda kichik, bu juda yuqori sezuvchanlik va reaktsiya tizimining kuchaytirish samaradorligini talab qiladi.
Xulosa
DirectPCR texnologiyasi PCR texnologiyasi paydo bo'lganidan beri so'nggi 30 yil ichida eng muhim texnologik ishlanmalar va innovatsiyalardan biridir.Forgene ushbu texnologiyaning kashshofi va innovatori bo'lgan va bo'lib qoladi.
DirectPCR texnologiyasini qo'llash istiqbollari juda keng.Ushbu texnologiyani doimiy ravishda takomillashtirish va targ'ib qilish, albatta, ilmiy tadqiqot va tekshirish ishlariga qo'zg'atuvchi o'zgarishlar olib keladi.Bu PCR texnologiyasining inqilobidir.
Yuborilgan vaqt: 2017 yil 21-fevral
