• facebook
  • linkedin
  • youtube

1

RNK ekstraktsiyasi haqida

O'ttiz yil oldin, RNKni olish uchun biz faqat to'liq RNKni qanday olish haqida o'ylashimiz mumkin edi, ammo ekstraksiya tezligiga hech qanday talab yo'q edi (Birinchi avlod texnologiyasi Trizol usuli tug'ilgan).RNK ekstraktsiya texnologiyasining takroriy yangilanishi bilan biz qila oladigan narsa natijalarni olish bilan cheklanib qolmaydi.Trizol asosidagi birinchi avlod reagentlarini ekstraksiya qilish bilan duch kelganda, eksperimentchilar odatda uning mashaqqatli operatsiya bosqichlari bilan bezovta bo'lishdi;ko'plab optimallashtirish va innovatsiyalardan so'ng, bu hali ham ko'p vaqt talab qildi.Shu bilan birga, ekstraksiya jarayonida fenol va xloroform kabi organik reagentlardan foydalanish kerak, bu ham ma'lum darajada tegishli xodimlarning xavfsizligiga tahdid soladi.

2Samarali, qulay va xavfsiz

Samarali, qulay va xavfsiz RNK ekstraktsiya mahsulotini topish eksperimentchilarning asosiy maqsadiga aylandi.Shu sababli, RNK ekstraktsiyasi uchun Silika Spin Column adsorbsiya usuli paydo bo'ldi.Foregene kompaniyasining uchinchi avlod RNK ekstraktsiyasi mahsulotlari oldingi avlod ustunli ekstraksiya mahsulotlarining afzalliklaridan foydalanadi, ular (faqat DNK-tozalash + RNK) ikkita Spin Column texnologiyasidan foydalangan holda, bir vaqtning o'zida gDNK va to'qimalar qoldiqlarini olib tashlash uchun, qoldiq gDNKni DNase bilan davolashsiz va endi fenoldan foydalanmaydilar. degradatsiya.

Operatsion jarayonlarni taqqoslash jadvali

3

Eksperimental natijalarni taqqoslash jadvali

Foregene umumiy RNK izolyatsiyasi to'plami yuqori RNK ekstraktsiyasi rentabelligi, yaxshi tozaligi va miRNKning ekstraktsiya ta'siri boshqa tovar to'plamlariga qaraganda yaxshiroq.

4

Turli usullar bilan ekstraksiya qilingan 50 mg sichqoncha jigarining umumiy RNKining elektroforezi
Birinchi avlod (1: Trizol)
Ikkinchi avlod (2: A kompaniyasidan RNK ekstraktsiyasi to'plami)
Uchinchi avlod (3: RNK ekstraktsiyasi to'plami va A kompaniyasidan, 4: Foregene: RNK izolyatsiyasi to'plamlari)

qPCR grafigi (kuchaytirish egri grafigi)

RNK ekstraktsiyasi vaqtida genomik DNK samarali tarzda olib tashlanishi kerak, aks holda u quyi oqimdagi tajribalarda nazorat qilib bo'lmaydigan ta'sirga ega bo'ladi (erta KT qiymati, noto'g'ri musbat).Foregene yangi avlod to'plami DNase qo'shmasdan genomik DNKni mukammal tarzda olib tashlashi mumkin, bu ko'p vaqtni tejaydi va ekzogen RNase ifloslanishidan kelib chiqadigan buzilishdan qochadi.
Birinchi avlod (yashil rang TRlzol-ni, qizil rang TRlzol+ni bildiradi)

5Ikkinchi avlod (ko'k rang A kompaniyasining RNK ekstraktsiya to'plamini bildiradi -, qizil rang A kompaniyasining RNK ekstraktsiya to'plamini bildiradi +)

6

Uchinchi avlod (ko'k rang kompaniyaning RNK ekstraktsiya to'plamini va yashil rang Foregene RNK izolyatsiyasi to'plamlarini bildiradi)

7

(Eslatma: qPCR grafigidagi "_" DNase qo'shilmaganligini va DNKning ifloslanishi olib tashlanmaganligini ko'rsatadi; "+" DNase qo'shilganligini va DNK ifloslanishi olib tashlanganligini bildiradi)

RNK ekstraktsiyasini 11 daqiqa ichida yakunlang

Ko'p yillar davomida nuklein kislotasini olish tajribasini to'plashning hojati yo'q, Foregene yuqori samarali umumiy RNK izolyatsiyasi to'plamlari seriyali mahsulotlari turli xil quyi oqim eksperimental ehtiyojlarini qondirish uchun 11 daqiqa ichida yuqori rentabellikdagi va yuqori toza RNKni olish imkonini beradi.

9Hozirgacha Foregene total RNK izolator to'plamlari seriyali mahsulotlari ko'plab mijozlar tomonidan tan olingan va ko'plab yuqori baholi adabiyotlarga hissa qo'shgan.Xaridorning teskari transkripsiyadan so'ng qayta aloqa elektroforez jadvalini va miqdoriy PCR kuchaytirish egri chizig'idan haqiqiy foydalanishi Foregene mahsulotlarini qo'llash orqali olingan RNK nafaqat yuqori konsentratsiyali, balki yaxshi yaxlitligini ko'rsatadi.Faqat bozor tomonidan sinovdan o'tgan mahsulot texnologiyasi hamma tomonidan ma'qullanishi mumkin.

1011

Hujayra umumiy RNK izolyatsiyasi to'plami

Yuqori RNK rentabelligi

Tez: RNK izolyatsiyasini 11 daqiqada tugating

Xavfsizlik: Hech qanday organik kimyoviy qo'shilmagan

Ba'zi yuqori ballli iqtiboslar:

1. Yuan Fang, Zezhong Liu, Yang Qiu va boshqalar.Dizayner peptidlar tomonidan RNK oqsillarining virusli bostiruvchisini inhibe qilish in vivo jonli ravishda enterovirus infektsiyasidan himoya qiladi, Immunitet, 54(10), 2021: 2231-2244.e6.(Agar: 31.745,Virusli RNK izolyatsiyasi to'plami,Mushuk raqami RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. Ren, Y., Vang, A., Vu, D. va boshqalar.Odamning sitomegalovirus oqsili UL37x1 tomonidan tug'ma immunitet va apoptozni ikki tomonlama inhibe qilish virusning samarali replikatsiyasini ta'minlaydi.Nat Microbiol 7, 1041–1053 (2022).(Agar: 30.964,Hujayra umumiy RNK izolyatsiyasi to'plami,Mushuk raqami RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6


Yuborilgan vaqt: 27-iyul-2022