Siz hali ham RNKni olish uchun Trizoldan foydalanasizmi?
Ey xudo, sog'liging haqida qayg'urma!
Trizol marginal bo'lib qolmoqchi, menga hali qorong'ulikda ekaningizni aytmaysizmi?

Trizol reagentining asosiy komponenti fenol bo'lib, eksperimental operatsiyada xloroform kabi organik reagentlar ham qo'shiladi.Uzoq muddatli ta'sir qilish sog'lig'ingizga zarar etkazadi, ayniqsa teri bilan bevosita aloqa qilish kuchli kimyoviy kuyishlar va doimiy izlarga olib kelishi mumkin.

Oddiy sharoitlarda laboratoriya hamkorlari xavflarni faqat o'zlarini to'liq qurollantirish (laborator xalatlari, qo'lqoplar va niqoblar kiyish) bilan kamaytirishlari mumkin.

Va sizga maslahatim: manbadan zarar bermaslik uchun Trizolni to'g'ridan-to'g'ri almashtiring.

1. RNK ekstraktsiyasining birinchi avlod mahsuloti
1987 yilda chiqdi (Trizol reagentlari)

afzalligi:
To'liqroq ekstraktsiya

Kamchiliklari:
Guanidin izotiyosiyanat-fenol-xloroform kabi toksik reagentlar talab qilinadi;
Qiyin operatsiya;
DNK ifloslanishini olib tashlash uchun DNase dan foydalanish kerak

2.RNK ekstraktsiyasining ikkinchi avlod mahsuloti
1994 yilda chiqdi (QIAGEN RNeasy va ko'pgina mahalliy mahsulotlar)

afzalligi:
Ustun santrifüj usuli qabul qilinadi, bu oson ishlaydi;

Kamchilik:
To'qimalarning qoldiqlarini olib tashlash uchun santrifüj qilish kerak
DNK ifloslanishini olib tashlash uchun DNase dan foydalanish kerak

3.RNK ekstraktsiyasining uchinchi avlod mahsuloti
2005 yilda chiqarilgan (QIAGEN RNeasy Plus va ForegenRNKni tozalash seriyali mahsulotlar)

afzalligi:
DNK va to'qimalarning qoldiqlarini bir vaqtning o'zida olib tashlash uchun to'g'ridan-to'g'ri DNKni olib tashlash ustunidan foydalaning, vaqt va kuchni tejaydi;
Xavfsiz va qulay, iflosliklarni osongina olib tashlash va DNK ifloslanishini oldini olish uchun filtr ustuni va DNase qo'shishning hojati yo'q

Keling, RNK ekstraktsiyasining birinchi avlod mahsuloti (Trizol), ikkinchi avlod mahsuloti (RNeasy) va uchinchi avlod mahsuloti (Foregene) o'rtasidagi operatsion farqlarni ko'rib chiqaylik:

Rasmdagi operatsiya aniq: uchinchi avlod mahsuloti aniq afzalliklarga ega

Ta'riflash uchun faqat uchta so'z: oson!Tez!Xavfsizlik

Eksperimental natijalarning PK diagrammasiuchunRNK ekstraktsiyasining birinchi avlodi, ikkinchi avlodi va uchinchi avlodi mahsulotlari:

1. Eelektroforetogramma

Birinchi avlod (1: Trizol)
Ikkinchi avlod (2: QIAGEN RNeasy)
Uchinchi avlod (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Qanday mahsulot yaxshi, siz taqqoslash orqali bilib olasiz
Foregene to'plami yordamida olingan RNK
Nafaqat yuqori konsentratsiya, balki yaxshi yaxlitlik ham

2.qPCR grafigi (kuchaytirish egri grafigi)

Birinchi avlod (Trizol)

Ikkinchi avlod (ko'k osmonanglatadiQIAGEN RNeasy-, qizilanglatadiQIAGEN RNeasy +)

Uchinchi avlod (ko'k - Foregene, yashil - QIAGEN RNeasy plus)

(Eslatma: QPCR grafigining ikkinchi avlod QIAGEN RNeasy toʻplam DNase qoʻshmasligi va DNK ifloslanishini olib tashlamasligini bildiradi. Shuning uchun KT yuqoriroq va natija aniq emas; QIAGEN RNeasy + DNase qoʻshilgan va DNK ifloslanishi olib tashlangan va natija aniq degan maʼnoni anglatadi)

Bu elektroforetogramma bo'ladimi yoki PCR miqdoriy kuchaytirish egri grafigi bo'ladimi, Foregene mahsulotlarining sifati xorijiy import mahsulotlaridan kam emas.