Patogen mikroorganizmlar inson tanasiga kirib borishi, infektsiyalarni va hatto yuqumli kasalliklarni yoki patogenlarni keltirib chiqarishi mumkin bo'lgan mikroorganizmlardir.Patogenlar orasida bakteriyalar va viruslar eng zararli hisoblanadi.

Infektsiya odamlarning kasallanishi va o'limining asosiy sabablaridan biridir.20-asrning boshlarida mikroblarga qarshi dorilarning kashf etilishi zamonaviy tibbiyotni o'zgartirib, odamlarga infektsiyalarga qarshi kurashish uchun "qurol" berdi, shuningdek, jarrohlik, organlarni transplantatsiya qilish va saratonni davolash imkonini berdi.Biroq, yuqumli kasalliklarga olib keladigan patogenlarning ko'p turlari mavjud, jumladan viruslar, bakteriyalar, zamburug'lar va boshqa mikroorganizmlar.Turli kasalliklarni tashxislash va davolashni takomillashtirish, odamlar salomatligini muhofaza qilish maqsadida

Salomatlik aniqroq va tezkor klinik sinov usullarini talab qiladi.Xo'sh, mikrobiologik aniqlash texnologiyalari nima?

01 An'anaviy aniqlash usuli

Patogen mikroorganizmlarni an'anaviy aniqlash jarayonida ularning ko'pchiligini bo'yash, etishtirish kerak va biologik identifikatsiya shu asosda amalga oshiriladi, shuning uchun mikroorganizmlarning har xil turlarini aniqlash mumkin va aniqlash qiymati yuqori.An'anaviy aniqlash usullari asosan smear mikroskopiyasi, ajratish madaniyati va biokimyoviy reaktsiya va to'qima hujayralari madaniyatini o'z ichiga oladi.

1 Smear mikroskopiyasi

Patogen mikroorganizmlar kichik o'lchamli va ko'pchilik rangsiz va shaffofdir.Ularni bo'yagandan so'ng mikroskop yordamida kattaligi, shakli, joylashishini va hokazolarni kuzatish mumkin.To'g'ridan-to'g'ri smearni bo'yash mikroskopik tekshiruvi oddiy va tezkor bo'lib, u hali ham erta tashxis qo'yish uchun gonokokk infektsiyasi, sil mikobakteriyasi, spiroxetal infektsiya va boshqalar kabi maxsus shakllarga ega bo'lgan patogen mikrobial infektsiyalarga nisbatan qo'llaniladi.To'g'ridan-to'g'ri fotomikroskopik tekshirish usuli tezroq bo'lib, patogenlarni maxsus shakllar bilan vizual tekshirish uchun ishlatilishi mumkin.Bu maxsus asboblar va jihozlarni talab qilmaydi.Bu hali ham asosiy laboratoriyalarda patogen mikroorganizmlarni aniqlashning juda muhim vositasidir.

2 Ajratish kulturasi va biokimyoviy reaksiya

Ajratish madaniyati asosan bakteriyalarning ko'p turlari mavjud bo'lganda va ulardan birini ajratish kerak bo'lganda qo'llaniladi.Ko'pincha balg'am, najas, qon, tana suyuqliklari va hokazolarda qo'llaniladi. Bakteriyalar uzoq vaqt davomida o'sib, ko'payganligi sababli, bu tekshirish usuli ma'lum vaqtni talab qiladi., Va partiyalarda qayta ishlanishi mumkin emas, shuning uchun tibbiyot sohasi an'anaviy o'qitish usullarini takomillashtirish va aniqlashning aniqligini oshirish uchun avtomatlashtirilgan o'qitish va identifikatsiyalash uskunalaridan foydalangan holda bu borada tadqiqotlar olib borishni davom ettirdi.

3 To‘qima hujayralari madaniyati

To'qima hujayralari asosan xlamidiya, viruslar va rikketsiyalarni o'z ichiga oladi.Turli patogen mikroorganizmlarda to'qima hujayralarining turlari har xil bo'lganligi sababli, to'qimalar patogen mikroorganizmlardan chiqarilgandan so'ng, tirik hujayralar subkultura bilan yetishtirilishi kerak.O'stirilgan patogen mikroorganizmlar hujayra patologik o'zgarishlarini imkon qadar kamaytirish uchun o'stirish uchun to'qima hujayralariga sepiladi.Bundan tashqari, to'qima hujayralarini etishtirish jarayonida patogen mikroorganizmlarni sezgir hayvonlarga to'g'ridan-to'g'ri emlash, so'ngra hayvonlarning to'qimalari va organlaridagi o'zgarishlarga qarab patogen mikroorganizmlarni tekshirish mumkin.

02 Genetik test texnologiyasi

Dunyoda tibbiy texnologiya darajasining doimiy takomillashishi bilan patogen mikroorganizmlarni samarali aniqlashga qodir bo'lgan molekulyar biologik aniqlash texnologiyasining rivojlanishi va rivojlanishi an'anaviy aniqlash jarayonida tashqi morfologik va fiziologik xususiyatlarni qo'llashning hozirgi holatini yaxshilashi va noyob genlardan foydalanishi mumkin. o'ziga xos afzalliklari bilan.

1 Polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PCR)

Polimeraza zanjiri reaktsiyasi (Polimeraza zanjiri reaktsiyasi, PCR) in vitro noma'lum fragmentda sinovdan o'tkazilishi kerak bo'lgan kichik miqdordagi gen fragmentini boshqarish va kuchaytirish uchun ma'lum oligonükleotid primerlaridan foydalanadigan usul.PCR tekshirilishi kerak bo'lgan genni kuchaytirishi mumkinligi sababli, u patogen infektsiyani erta tashxislash uchun ayniqsa mos keladi, ammo primerlar o'ziga xos bo'lmasa, u noto'g'ri pozitivlarga olib kelishi mumkin.PCR texnologiyasi so'nggi 20 yil ichida jadal rivojlandi va uning ishonchliligi genlarni kuchaytirishdan genlarni klonlash va transformatsiya va genetik tahlilga qadar asta-sekin yaxshilandi.Ushbu usul, shuningdek, ushbu epidemiyada yangi koronavirusni aniqlashning asosiy usuli hisoblanadi.

Foregene Buyuk Britaniya, Braziliya, Janubiy Afrika va Hindistondagi oddiy 2 gen, 3 gen va variantlarni aniqlash uchun Direct PCR texnologiyasi asosida RT-PCR to'plamini ishlab chiqdi, mos ravishda B.1.1.7 nasl (Buyuk Britaniya), B.1.351 nasl (ZA), B.1.617 nasl (IND) va P.1 nasl (BR).

2 Gen chip texnologiyasi

Gen chip texnologiyasi yuqori zichlikdagi DNK bo'laklarini yuqori tezlikda robototexnika yoki in-situ sintez orqali ma'lum tartibda yoki tartibga solishda membranalar va shisha plitalar kabi qattiq sirtlarga biriktirish uchun mikroarray texnologiyasidan foydalanishni anglatadi.Izotoplar yoki flüoresans bilan belgilangan DNK problari bilan va asosiy komplementar gibridizatsiya printsipi yordamida genlarni ifodalash va monitoring qilish kabi ko'plab tadqiqot usullari amalga oshirildi.Patogen mikroorganizmlarni tashxislashda gen chip texnologiyasini qo'llash tashxis vaqtini sezilarli darajada qisqartirishi mumkin.Shu bilan birga, u patogenning dori-darmonlarga chidamliligini, qaysi dorilarga chidamliligini va qaysi dorilarga sezgirligini aniqlashi mumkin, shuning uchun klinik dori-darmonlarga murojaat qilish mumkin.Biroq, ushbu texnologiyaning ishlab chiqarish qiymati nisbatan yuqori va chiplarni aniqlashning sezgirligini yaxshilash kerak.Shuning uchun bu texnologiya hali ham laboratoriya tadqiqotlarida qo'llaniladi va klinik amaliyotda keng qo'llanilmagan.

3 Nuklein kislotalarni duragaylash texnologiyasi

Nuklein kislotalarning gibridlanishi - patogen mikroorganizmlarda bir-birini to'ldiruvchi ketma-ketlikka ega bo'lgan nukleotidlarning bir qatorlari hujayralarda birlashib, geteroduplekslarni hosil qilish jarayonidir.Gibridlanishga olib keladigan omil patogen mikroorganizmlarni aniqlash uchun nuklein kislota va zondlar o'rtasidagi kimyoviy reaktsiyadir.Hozirgi vaqtda patogen mikroorganizmlarni aniqlash uchun ishlatiladigan nuklein kislotalarni qayta o'tkazish usullari asosan nuklein kislotani in situ gibridizatsiyasi va membranani gibridizatsiya qilishni o'z ichiga oladi.Nuklein kislota in situ gibridizatsiyasi patogen hujayralardagi nuklein kislotalarning etiketli zondlar bilan duragaylanishini anglatadi.Membrana blot duragaylash deganda eksperimentator patogen hujayraning nuklein kislotasini ajratgandan so'ng uni tozalab, qattiq tayanch bilan birlashtiriladi, so'ngra buxgalteriya probi bilan gibridlanadi.Buxgalteriya hibridizatsiya texnologiyasi qulay va tez ishlashning afzalliklariga ega va sezgir va maqsadli patogen mikroorganizmlar uchun javob beradi.

03 Serologik tekshirish

Serologik tekshiruv patogen mikroorganizmlarni tezda aniqlash imkonini beradi.Serologik tekshirish texnologiyasining asosiy printsipi patogenlarni ma'lum patogen antijenler va antikorlar orqali aniqlashdir.An'anaviy hujayra ajratish va madaniyat bilan solishtirganda, serologik testning operatsion bosqichlari oddiy.Tez-tez ishlatiladigan aniqlash usullari lateks aglutinatsiya testi va ferment bilan bog'liq immunoassay texnologiyasini o'z ichiga oladi.Fermentga bog'langan immunoassay texnologiyasini qo'llash serologik testning sezgirligi va o'ziga xosligini sezilarli darajada yaxshilashi mumkin.U nafaqat sinov namunasidagi antijenni, balki antikor komponentini ham aniqlay oladi.

2020-yil sentabr oyida Amerika Yuqumli Kasalliklar Jamiyati (IDSA) COVID-19 diagnostikasi uchun serologik testlar boʻyicha koʻrsatmalar chiqardi.

04 Immunologik tekshirish

Immunologik aniqlash, shuningdek, immunomagnit boncuklarni ajratish texnologiyasi deb ataladi.Ushbu texnologiya patogenlarda patogen va patogen bo'lmagan bakteriyalarni ajratishi mumkin.Asosiy printsip: bitta antijeni yoki bir nechta turdagi o'ziga xos patogenlarni ajratish uchun magnit boncuk mikrosferalaridan foydalanish.Antigenlar birgalikda yig'iladi va patogen bakteriyalar antigen tanasi va tashqi magnit maydonning reaktsiyasi orqali patogenlardan ajratiladi.

Patogenni aniqlash hotspots-nafas olish patogenini aniqlash

Foregene kompaniyasining "15 nafas olish tizimi patogen bakteriyalarini aniqlash to'plami" ishlab chiqilmoqda.To'plam balg'amdagi nuklein kislotani tozalashga hojat qoldirmasdan balg'amdagi 15 turdagi patogen bakteriyalarni aniqlay oladi.Samaradorlik nuqtai nazaridan, u asl 3 dan 5 kungacha 1,5 soatgacha qisqartiradi.