Nuklein kislota ekstraktsiyasi molekulyar biologiya tajribalari uchun kirish mahoratidir.U ushbu mahoratni o'zlashtira oladimi va undan mohirona foydalana oladimi yoki yo'qmi, keyingi eksperimentchilar uchun eksperimental ustalar darajasiga ko'tarilishning asosiy shartiga aylandi.
Turli tadqiqot materiallariga ko'ra, eksperimentatorlar asosan quyidagi uch turga bo'linadi:
Hayvonlar ixtisosligi, o‘simlikshunoslik, mikrobiologiya
Har bir eksperimentator turi ma'lum namunalar uchun eksklyuziv ko'nikmalar to'plamini rivojlantirish uchun nusxalarni nusxalashni davom ettiradi.
Bugun muharrir eksperimentchilarga zindon orqali mavjud bo'lmagan ba'zi jihozlar va rekvizitlarni olib kelmoqchi.Ular yordamida siz barcha yo'nalishlarda tezda yangilashingiz mumkin.Eksperimental xudo bo'lish orzu emas.
Bu masala o'simliklarning professional eksperimentatorlari uchun mo'ljallangan (boshqa kasblardagi tajribachilar ham undan o'rganishlari mumkin~).
Ishonchim komilki, eksperimentchilarning har bir avlodi o'zlarining o'tmishdoshlaridan avloddan-avlodga o'tadigan klassik o'simlik nuklein kislotasini olish usullari haqida eshitgan bo'ladi.O'simliklarni qazib olish sanoatidagi uchta katta nom.
Katta yigitlar zo'r bo'lsa-da, ular hali ham ba'zi muqarrar kamchiliklarga ega.
TRIzol usuli
Ko'pincha ekstraktsiya qilish uchun ishlatiladi
RNK
●Toksik va og‘ir
●Genom kontaminatsiyasini o'z ichiga olgan
CTAB usuli
Ko'pincha ekstraktsiya qilish uchun ishlatiladi
genomDNK
●Vaqt talab qiladi
● CTAB ni yuvish bilan olib tashlash tuzdan ko'ra qiyinroq, oz miqdordagi qoldiq ferment faolligiga katta ta'sir qiladi.
SDS usuli
Ko'pincha ekstraktsiya qilish uchun ishlatiladi
plazmid
●Yuqori polisakkaridli o'simliklar uchun mos emas
●Oqsil bilan ifloslanish
Ikki tezlikda yangilanadigan iteratsiyalar mavjud bo'lgan ushbu zamonaviy jamiyatda an'anaviy ishlash usullari endi eksperimentatorlarning ehtiyojlarini qondira olmaydi va uskunalar yangilanishi kutilmoqda.
Foregene nuklein kislotasi ekstraktsiyasi to'plami o'nlab tajribachilar tomonidan N marta sinovdan o'tkazildi.U oddiy ishlaydi, hech qanday zaharli reagentlardan foydalanmaydi va hech qanday ferment qo'shmaydi.Olingan nuklein kislota yuqori tozalikka ega bo'lib, bu ajoyib eksperimentatorlarning kunlik ekstraktsiyasi uchun zarurdir.
Foregene RNK izolyatsiyasi to'plami
Bu yerda men eksperimentchilarga yashirin operatsiya texnikasini ham ochib beraman, ya’ni o‘simlik turiga ko‘ra to‘g‘ri ekstraksiya usulini tanlash (o‘simlik turini aniqlash usuli maqola oxirida!), chunki ba’zi o‘simlik polisaxaridlari va polifenollari yuqori tarkibga ega, an’anaviy usullar esa o‘limga olib keladi.Nazorat qilish uchun etarli emas.
Xo'sh, bu shunday ...
TRIzol usuli to'g'ridan-to'g'ri banan barglari, ginkgo barglari va paxta barglari kabi yuqori darajadagi polisakkaridlar va polifenollarga ega bo'lgan namunalar ostida tiz cho'kdi.
Shu maqsadda Foregene eksperimentchilar uchun ikkita samarali vositani ishlab chiqdi.Polisakkarid va polifenol miqdori past, polisakkarid va polifenol miqdori yuqori bo'lgan o'simlik RNK ekstraktsiyasi to'plami dushmanlarni maqsadli tarzda o'ldirishi mumkin, shuning uchun eksperimentchilar endi turli o'simliklardan qo'rqmaydi.Uskunani to'g'ridan-to'g'ri o'zgartiring!
Ekstraksiya usulini yangilash zarurati bilan bir qatorda, namunani oldindan qayta ishlash operatsiyalari ham yangilanishi kerak.
O'simlik namunalarining maxsus tuzilishi tufayli ba'zi o'simliklarning ildizlari va qattiqroq poyalarini maydalash va bir tekis maydalash qiyinroq.
Tegirmon sanoatida odamlarning taxminan 80% silliqlash uchun suyuq azotdan foydalanadi, 20% dan kamrog'i esa elektr silliqlash va silliqlash boncuk tebranishini ishlatadi.
Suyuq azotni maydalash arzon va ulardan foydalanish oson bo'lsa-da, bu har safar va harakatni maydalash uchun katta namuna talabiga ega bo'lgan tajribachilar uchun dahshatli tush!Agar ohak tozalanmasa, u namunalar orasidagi o'zaro kontaminatsiyaga olib keladi.
Elektr silliqlashning ta'siri odamdan odamga o'zgarib turadi va eksperimentchilarning ishlash odatlari nuklein kislotaning yaxlitligiga ko'proq ta'sir qiladi va agar kerak bo'lsa, past haroratda ishlash talab etiladi.
Shunday qilib, silliqlash boncuklarining tebranishini hozirgi oddiy va samarali silliqlash uskunasi deb hisoblash mumkin.
Umumiy tebranish rejimlariga vertikal tebranish, gorizontal o'zaro tebranish va uch o'lchovli (gorizontal tebranish) kiradi.Biroq, Foregene ning to'qimalarni maydalagichi mavjud modelni buzadi va silliqlashni yanada bir xil qilish uchun yangi 4D tebranish usulini qo'llaydi.
Har xil namunaviy talablarga javob bering, ishlatish oson
Noyob 4D maydalash texnologiyasi, maydalash samaradorligi 20% ga oshiriladi
Namuna to'liq yopiq, o'zaro ifloslanish yo'q
Jim, ≤56 desibel
Tajriba natijalarini to'lqin bilan solishtiring~
Sinov namunasi: 50 mg bug'doy barglari (polisaxaridlar va polifenollarning kam miqdori)
Ekstrakt nuklein kislota turi: RNK
Spot miqdori: 5 mkl
Amaldagi ekstraksiya to'plami Foregene Plant Total RNK Extraction Kit (RE-05011)
Ma'lumotlar va elektroforez grafigini solishtirsak, mashinada silliqlashdan keyin olingan RNKning kontsentratsiyasi va tozaligi suyuq azotli silliqlashdan yuqori ekanligini ko'rish mumkin.Shu bilan birga, mashina silliqlash namunani to'liq sindirishi mumkinligi sababli, kichik RNKni yaxshiroq ajratib olish va RNKning yaxlitligini saqlash mumkin.
Sinov namunasi: 50 mg ginkgo barglari (yuqori polisakkarid va polifenol miqdori)
Ekstrakt nuklein kislota turi: RNK
Spot miqdori: 5 mkl
Foregene polisaxarid polifenol zavodining umumiy RNK ekstraktsiyasi to'plamidan foydalanish (RE-05021)
Polisaxaridlar va polifenollarning yuqori miqdori bo'lgan ushbu guruh namunalarini ko'rib chiqing.Ta'siri yanada aniqroq.Xuddi shu tozalik bilan, mashinada silliqlash RNK kontsentratsiyasi suyuq azotli maydalashdan deyarli 5 baravar ko'pdir va kichik RNK hali ham zaif ko'rinadi ~
Agar yuqoridagi jihozlarning hech biri yetarlicha tez emas deb hisoblasangiz, muharrir eng yaxshi uskunani o'ylab topishi kerak!
O'simlik to'g'ridan-to'g'ri PCR seriyasi
Ushbu uskunaning o'ziga xos xususiyati shundaki, o'simlik barglari yoki urug'larini maydalash va sindirish kerak emas va liziz uchun to'g'ridan-to'g'ri EP trubkasiga tashlanadi va hosil bo'lgan liziz aralashmasi PCR reaktsiyasi uchun shablon sifatida ishlatilishi mumkin.Bu bir qadam tezroq kabi oddiy!Shu bilan birga, Foregene o'simliklarining to'g'ridan-to'g'ri PCR seriyasi UNG ifloslanishga qarshi tizimi bilan jihozlangan, shuning uchun eksperimentchilar laboratoriyada aerozol ifloslanishi haqida tashvishlanmaydilar va tajribani osongina o'tkazishlari mumkin.
Hukm qilish bo'yicha maslahatlar:
Bu polisakkarid polifenol o'simlikmi yoki yo'qligini qanday aniqlash mumkin
Taxminan 20 mg to'qima blokini oling va uni 1,5 ml toza santrifüj trubasiga soling, 200ul 200mM NaOH eritmasini qo'shing, uni 95 ℃ da 10 daqiqaga joylashtiring, lizisdan keyin rang o'zgarishini kuzating.
1. Agar lizatning rangi yashil yoki och sariq bo'lsa, bu to'qimalarda polifenollarning kamligini anglatadi va Foregene Plant seriyasidan foydalanish tavsiya etiladi.
2. Agar lizat jigarrang-sariq yoki jigarrang-qizil bo'lsa, bu to'qimalarda polifenol miqdori yuqori ekanligini anglatadi va Foregene polisaxarid polifenol zavodi Plus seriyasidan foydalanish tavsiya etiladi.
Yuborilgan vaqt: 20-avgust-2021-yil
