• facebook
  • linkedin
  • youtube

Immunoglobulinlar (Ig) deb ham ataladigan antikorlar antijenler bilan maxsus bog'langan glikoproteinlardir.
 
An'anaviy antikor tayyorlash hayvonlarni immunizatsiya qilish va antiserum to'plash orqali ishlab chiqariladi.Shuning uchun antiserum odatda boshqa bog'liq bo'lmagan antigenlarga va zardobdagi boshqa oqsil komponentlariga qarshi antikorlarni o'z ichiga oladi.Umumiy antigen molekulalari asosan bir nechta turli epitoplarni o'z ichiga oladi, shuning uchun an'anaviy antikorlar ham bir nechta turli epitoplarga qarshi antikorlarning aralashmasidir.Hatto bir xil epitopga qarshi qaratilgan an'anaviy sarum antikorlari ham turli xil B hujayra klonlari tomonidan ishlab chiqarilgan heterojen antikorlardan iborat.Shuning uchun an'anaviy sarum antikorlari poliklonal antikorlar yoki qisqacha poliklonal antikorlar deb ham ataladi.
 
Monoklonal antikor (monoklonal antikor) - bu bitta B hujayrali kloni tomonidan ishlab chiqarilgan va faqat ma'lum bir epitopga qarshi qaratilgan juda bir xil antikor.Odatda gibridoma texnologiyasi bilan tayyorlanadi - gibridoma antikorlari texnologiyasi hujayra termoyadroviy texnologiyasiga asoslangan bo'lib, B hujayralarini o'ziga xos antikorlarni va cheksiz o'sish qobiliyatiga ega miyelom hujayralarini B-hujayra gibridomalariga ajratish qobiliyatiga ega.Bu gibridoma hujayrasi ota-ona hujayraning xususiyatlariga ega.U miyelom hujayralari kabi in vitro cheksiz va o'lmas ravishda ko'payishi mumkin va taloq limfotsitlari kabi o'ziga xos antikorlarni sintez qilishi va ajratishi mumkin.Klonlash orqali bitta gibridoma hujayradan olingan monoklonal chiziq, ya'ni gibridoma hujayra chizig'ini olish mumkin.U ishlab chiqaradigan antikorlar bir xil antijenik determinantga, ya'ni monoklonal antikorlarga nisbatan yuqori darajada bir hil antikorlardir.
 
Antikorlar bir yoki bir nechta Y shaklidagi monomerlar (ya'ni, monoklonal antikorlar yoki poliklonal antikorlar) shaklida mavjud.Har bir Y shaklidagi monomer ikkita bir xil og'ir zanjir va ikkita bir xil engil zanjirni o'z ichiga olgan 4 ta polipeptid zanjiridan iborat.Engil zanjir va og'ir zanjir molekulyar og'irligiga qarab nomlanadi.Y shaklidagi strukturaning yuqori qismi o'zgaruvchan hudud bo'lib, u antijen bilan bog'lanish joyidir.(Bio-monoklonal antikorlar kontseptsiyasidan parcha)
 
Antikor tuzilishi
1Og'ir zanjir
Sutemizuvchilar Ig og'ir zanjirlarining besh turi mavjud bo'lib, ular yunoncha a, d, e, g va m harflari bilan nomlanadi.Tegishli antikorlar IgA, IgD, IgE, IgG va IgM deb ataladi.Turli xil og'ir zanjirlar hajmi va tarkibi bilan farqlanadi.a va g tarkibida taxminan 450 ta aminokislotalar, m va e tarkibida esa 550 ga yaqin aminokislotalar mavjud.
Har bir og'ir zanjir ikkita hududga ega: doimiy mintaqa va o'zgaruvchan mintaqa.Xuddi shu turdagi barcha antikorlar bir xil doimiy mintaqaga ega, ammo har xil turdagi antikorlar o'rtasida farqlar mavjud.Og'ir zanjirlarning doimiy hududlari g, a va d tandemda uchta Ig domenidan iborat bo'lib, uning moslashuvchanligini oshirish uchun menteşe mintaqasi mavjud;og'ir zanjirlarning m va e doimiy hududlari 4 Ig domenidan iborat.Turli xil B hujayralari tomonidan ishlab chiqarilgan antikorning og'ir zanjirining o'zgaruvchan hududi boshqacha, lekin bir xil B hujayra yoki hujayra kloni tomonidan ishlab chiqarilgan antikorning o'zgaruvchan hududi bir xil va har bir og'ir zanjirning o'zgaruvchan hududi uzunligi taxminan 110 aminokislotadir., Va bitta Ig domenini hosil qiladi.
 
Yengil zanjir
Sutemizuvchilarda faqat ikkita turdagi engil zanjirlar mavjud: lambda tipi va kappa tipi.Har bir engil zanjir ikkita bog'langan domenga ega: doimiy mintaqa va o'zgaruvchan mintaqa.Engil zanjirning uzunligi taxminan 211 ~ 217 aminokislotadan iborat.Har bir antikor tarkibidagi ikkita engil zanjir har doim bir xil bo'ladi.Sutemizuvchilar uchun har bir antikordagi engil zanjir faqat bitta turga ega: kappa yoki lambda.Ba'zi pastki umurtqali hayvonlarda, masalan, xaftaga tushadigan baliqlar (xaftaga tushadigan baliqlar) va suyak baliqlarida, iota (iota) turi kabi engil zanjirlarning boshqa turlari ham uchraydi.
 
Fab va Fc segmentlari
Antikorlarni belgilash uchun Fc segmenti to'g'ridan-to'g'ri fermentlar yoki floresan bo'yoqlar bilan birlashtirilishi mumkin.Bu Elishay jarayonida antikor plastinkaga perchinlanadigan qismdir, shuningdek, ikkinchi antikor immunoprecipitatsiya, immunoblotting va immunohistokimyoda tan olinadigan va bog'langan qismdir.Antikorlar papain kabi proteolitik fermentlar ta'sirida ikkita F(ab) segmentiga va bitta Fc segmentiga gidrolizlanishi mumkin yoki ular pepsin ta'sirida menteşe hududidan parchalanib, bitta F(ab)2 segmentiga va bitta Fc segmentiga gidrolizlanishi mumkin.IgG antikor fragmentlari ba'zan juda foydali.Fc segmentining etishmasligi tufayli F (ab) segmenti antijen bilan cho'kmaydi va u in vivo tadqiqotlarda immun hujayralar tomonidan ushlanmaydi.Kichik molekulyar fragmentlar va o'zaro bog'lanish funktsiyasi yo'qligi sababli (Fc segmenti yo'qligi sababli) Fab segmenti odatda funktsional tadqiqotlarda radioyorliqlash uchun ishlatiladi va Fc segmenti asosan gistokimyoviy bo'yashda blokirovka qiluvchi vosita sifatida ishlatiladi.
 
O'zgaruvchan va doimiy hududlar
O'zgaruvchan hudud (V hududi) H zanjirining 1/5 yoki 1/4 qismida (taxminan 118 aminokislota qoldig'ini o'z ichiga olgan) N-terminus yaqinida va L zanjirining N-uchiga yaqin 1/2 qismida (taxminan 108-111 aminokislota qoldig'ini o'z ichiga olgan) joylashgan.Har bir V mintaqada zanjir ichidagi disulfid aloqalari natijasida hosil bo'lgan peptid halqasi mavjud va har bir peptid halqasida taxminan 67 dan 75 gacha aminokislotalar qoldiqlari mavjud.V mintaqadagi aminokislotalarning tarkibi va joylashuvi antikorning antijen bilan bog'lanish o'ziga xosligini aniqlaydi.V mintaqadagi aminokislotalarning doimiy o'zgaruvchan turlari va ketma-ketligi tufayli turli xil bog'lovchi antigen o'ziga xos xususiyatlarga ega bo'lgan ko'plab turdagi antikorlar hosil bo'lishi mumkin.L zanjiri va H zanjirining V hududlari mos ravishda VL va VH deb ataladi.VL va VHda ba'zi mahalliy hududlarning aminokislotalar tarkibi va ketma-ketligi yuqori darajadagi o'zgarishlarga ega.Ushbu hududlar gipervariable mintaqalar (HVR) deb ataladi.V mintaqadagi HVR bo'lmagan qismlarning aminokislotalar tarkibi va joylashuvi nisbatan konservativdir, bu ramka mintaqasi deb ataladi.VLda uchta gipero'zgaruvchan hudud mavjud bo'lib, odatda aminokislota qoldiqlarida 24 dan 34 gacha va 89 dan 97 gacha joylashgan.VL va VH ning uchta HVRlari mos ravishda HVR1, HVR2 va HVR3 deb ataladi.X-nurlarining kristall diffraktsiyasini tadqiq qilish va tahlil qilish shuni ko'rsatdiki, gipero'zgaruvchan mintaqa haqiqatan ham antikor antigenini bog'laydigan joydir, shuning uchun u komplementarlikni aniqlovchi mintaqa (CDR) deb ataladi.VL va VH ning HVR1, HVR2 va HVR3 mos ravishda CDR1, CDR2 va CDR3 deb nomlanishi mumkin.Odatda, CDR3 yuqori darajadagi gipervariativlikka ega.Gipervariable mintaqa, shuningdek, Ig molekulalarining idiotipik determinantlari mavjud bo'lgan asosiy joydir.Aksariyat hollarda H zanjiri antigen bilan bog'lanishda muhimroq rol o'ynaydi.
2Doimiy mintaqa (C mintaqasi)H zanjirining 3/4 yoki 4/5 qismida (taxminan 119 aminokislotadan C terminaligacha) C terminali yaqinida va L zanjirining C uchiga yaqin 1/2 qismida (taxminan 105 aminokislota qoldig'i mavjud) joylashgan.H zanjirining har bir funktsional hududida 110 ga yaqin aminokislota qoldiqlari mavjud va disulfid bog'lari bilan bog'langan 50-60 aminokislotalar qoldiqlaridan tashkil topgan peptid halqasi mavjud.Bu hududning aminokislota tarkibi va joylashuvi bir xil hayvon Ig izotipi L zanjirida va bir xil turdagi H zanjirida nisbatan doimiydir.Xuddi shunday, u faqat mos keladigan antigen bilan maxsus bog'lanishi mumkin, ammo uning S mintaqasining tuzilishi bir xil, ya'ni bir xil antigenlik xususiyatiga ega.Ot anti-inson IgG ikkilamchi antikor (yoki anti-antikor) turli ekzotoksinlar paydo bo'lgan ikki A birikmasi antikorlar (IgG) bilan birlashtirilishi mumkin.Bu ikkilamchi antikorlarni tayyorlash va flüoresan, izotoplar, fermentlar va boshqa etiketli antikorlarni qo'llash uchun muhim asosdir.
 
 
Tegishli mahsulotlar:
Cell Direct RT-qPCR to'plami

 

 


Yuborilgan vaqt: 2021 yil 30-sentabr