• facebook
  • linkedin
  • youtube
English
page_banner

Foreasy HS Taq DNK polimeraza

Foreasy HS Taq DNK Polimeraza Tavsiya etilgan rasm
  • Foreasy HS Taq DNK polimeraza

To'plam tavsifi:

◮Yuqori o'ziga xoslik: yuqori issiq boshlash faolligiga ega ferment.

◮Tez kuchaytirish: 10 sek/kb.

◮Shablonning yuqori moslashuvi: Yuqorini samarali kuchaytirish uchun foydalanish mumkinGCqiymatvaturli xil kuchaytirilishi qiyin bo'lgan DNK shablonlari.

◮Kuchli sodiqlik: sodiqlik 6 martaof oddiy Taq fermenti.

oldingi kuch


Mahsulot detali

Mahsulot teglari

TSS

Tavsif

Foreasy HS Taq DNK polimeraza gen rekombinatsiyasi texnologiyasi bilan Escherichia coli muhandislik bakteriyalarida ifodalangan yangi Taq fermentidir.Ferment maxsus jarayon bilan ishlov berilgandan so'ng, u'ning faolligi termal faollashuvdan oldin inhibe qilinadi va shu bilan past harorat sharoitida primerlar yoki primer dimerlarning o'ziga xos bo'lmagan tavlanishi natijasida kelib chiqadigan o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirishni inhibe qiladi.Ushbu mahsulot juda o'ziga xos PCR reaktsiyasi uchun javob beradiion, M ultiple x PCR , yuqori GC tarkibi (> 60%),bilanikkilamchi tuzilmayoki boshqakuchli fon genomiicskuchaytirish va keng ko'lamli genomicskuchaytirishni aniqlash.Fermentda 5' → 3' DNK polimeraza faolligi va 5' → 3' ekzonukleaza faolligi mavjud, ammo 3' → 5' ekzonukleaza faolligi yo'q.

To'plam komponentlari

Komponent IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNK polimeraza (5 U/mkl)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2 × Taq reaktsiyasi buferi  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Xususiyatlari va afzalliklari

- Yuqori o'ziga xoslik: yuqori issiq boshlash faolligiga ega ferment.

- Tez kuchaytirish: 10 sek/kb.

- Shablonning yuqori moslashuvi: Yuqorini samarali kuchaytirish uchun foydalanish mumkinGCqiymatvaturli xil kuchaytirilishi qiyin bo'lgan DNK shablonlari.

- Kuchli sodiqlik: sodiqlik 6 martaof oddiy Taq fermenti.

Kit ilovasi

- Har xil PCR/qPCR tizimi va to'g'ridan-to'g'ri PCR tizimi

- PCR kuchaytirilgan DNK fragmenti

- DNK belgisi

- DNK ketma-ketligi

- PCR plus A dumi

Faoliyat ta'rifi

1U: 10 nmol ni kiritish uchun zarur bo'lgan ferment miqdoriDNKShablon/primer sifatida faollashtirilgan qizil ikra sperma DNKsi yordamida kislotada erimaydigan moddalarga, 74 °C, 30 daqiqa.

Reaktsiya holati

Harorat Reaktsiya vaqti Tsikl vaqti
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 soniya  40
60°C 10 soniya

Eslatma:10 µL va 20 µL tizimlar uchun termal siklda issiqlik qopqog‘i bo‘lmasa, teng miqdorda mineral moy qo‘shing.

PCR reaktsiyasi shartlari shablonlarning, primerlarning va shunga o'xshashlarning strukturaviy shartlariga qarab o'zgaradi.Muayyan operatsiyada shablon turi, maqsadli fragmentning o'lchami, kuchaytirilgan fragmentning asosiy ketma-ketligi va astarning GC tarkibi va uzunligi kabi o'ziga xos shartlarga muvofiq tavlanish harorati, uzaytirish vaqti va boshqalarni o'z ichiga olgan optimal reaktsiya sharoitlarini loyihalash kerak.

Saqlash

2 yil davomida -20 ± 5 ° C yoki uzoq muddatli saqlash uchun -80 ° C da.

  • Oldingi:
  • Keyingisi:

    • Kuchaytirish signallari yo'q

    1.To'plamdagi Taq DNK polimeraza noto'g'ri saqlanishi yoki to'plamning amal qilish muddati tugashi tufayli o'z faoliyatini yo'qotadi.
    Tavsiya: to'plamni saqlash shartlarini tasdiqlang;PCR tizimiga tegishli miqdorda Taq DNK polimerazasini qayta qo'shing yoki tegishli tajribalar uchun yangi Real Time PCR to'plamini sotib oling.

    2.DNK shablonida Taq DNK polimeraza ingibitorlari ko'p.
    Taklif: Shablonni yangilang yoki ishlatiladigan shablon miqdorini kamaytiring.

    3.Mg2+ konsentratsiyasi mos emas.
    Tavsiya: Biz taqdim etayotgan 2× Real PCR aralashmasining Mg2+ konsentratsiyasi 3,5 mM.Biroq, ba'zi maxsus primerlar va shablonlar uchun Mg2 + kontsentratsiyasi yuqori bo'lishi mumkin.Shuning uchun Mg2+ konsentratsiyasini optimallashtirish uchun to'g'ridan-to'g'ri MgCl2 qo'shishingiz mumkin.Optimallashtirish uchun har safar Mg2+ 0,5 mM ni oshirish tavsiya etiladi.

    4. PCR kuchaytirish shartlari mos emas va primer ketma-ketligi yoki konsentratsiyasi noto'g'ri.
    Taklif: primer ketma-ketligining to'g'riligini tasdiqlang va primer buzilmagan;agar kuchaytirish signali yaxshi bo'lmasa, tavlanish haroratini pasaytirishga harakat qiling va primer konsentratsiyasini mos ravishda moslashtiring.

    5. Shablon miqdori juda oz yoki juda ko'p.
    Tavsiya: Shablonni linearizatsiya gradientini suyultirishni amalga oshiring va Real Time PCR tajribasi uchun eng yaxshi PCR effekti bilan shablon konsentratsiyasini tanlang.

    NTC juda yuqori floresans qiymatiga ega

    1.Ishlash jarayonida yuzaga kelgan reagentning ifloslanishi.
    Tavsiya: Real Time PCR tajribalari uchun yangi reagentlar bilan almashtiring.

    2.PZR reaktsiya tizimini tayyorlash jarayonida kontaminatsiya sodir bo'ldi.
    Tavsiya: Ish paytida zaruriy himoya choralarini ko'ring, masalan: lateks qo'lqop kiyish, filtrli pipetka uchidan foydalanish va hokazo.

    3. Primerlar buziladi va primerlarning degradatsiyasi o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirilishiga olib keladi.
    Taklif: SDS-PAGE elektroforezidan foydalanib, primerlar degradatsiyaga uchragan yoki yo'qligini aniqlang va ularni Real Time PCR tajribalari uchun yangi primerlar bilan almashtiring.

    Primer dimer yoki o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirish

    1.Mg2+ konsentratsiyasi mos emas.
    Tavsiya: Biz taqdim etayotgan 2× Real PCR EasyTM Mixning Mg2+ konsentratsiyasi 3,5 mM.Biroq, ba'zi maxsus primerlar va shablonlar uchun Mg2 + kontsentratsiyasi yuqori bo'lishi mumkin.Shuning uchun Mg2+ konsentratsiyasini optimallashtirish uchun to'g'ridan-to'g'ri MgCl2 qo'shishingiz mumkin.Optimallashtirish uchun har safar Mg2+ 0,5 mM ni oshirish tavsiya etiladi.

    2. PCR tavlanish harorati juda past.
    Taklif: PCR tavlanish haroratini har safar 1 ℃ yoki 2 ℃ ga oshiring.

    3. PCR mahsuloti juda uzun.
    Tavsiya: Real Time PCR mahsulotining uzunligi 100-150bp orasida, 500bp dan oshmasligi kerak.

    4. Primerlar buziladi va primerlarning degradatsiyasi o'ziga xos kuchaytirishning paydo bo'lishiga olib keladi.
    Taklif: SDS-PAGE elektroforezidan foydalanib, primerlar degradatsiyaga uchragan yoki yo'qligini aniqlang va ularni Real Time PCR tajribalari uchun yangi primerlar bilan almashtiring.

    5. PCR tizimi noto'g'ri yoki tizim juda kichik.
    Taklif: PCR reaktsiya tizimi juda kichik bo'lsa, aniqlash aniqligi pasayadi.Real Time PCR tajribasini qayta o'tkazish uchun miqdoriy PCR asbobi tomonidan tavsiya etilgan reaksiya tizimidan foydalanish yaxshidir.

    Miqdoriy qiymatlarning yomon takrorlanishi

    1. Asbob noto'g'ri ishlayapti.
    Taklif: Asbobning har bir PCR teshigi o'rtasida xatolar bo'lishi mumkin, bu esa haroratni boshqarish yoki aniqlashda yomon takrorlanishga olib keladi.Iltimos, tegishli asbobning ko'rsatmalariga muvofiq tekshiring.

    2.Namunaning tozaligi yaxshi emas.
    Tavsiya: Nopok namunalar shablon va primerlarning tozaligini o'z ichiga olgan tajribaning yomon takrorlanishiga olib keladi.Shablonni qayta tozalash eng yaxshisidir va primerlar SDS-PAGE orqali eng yaxshi tozalanadi.

    3. PCR tizimini tayyorlash va saqlash muddati juda uzoq.
    Taklif: Tayyorgarlikdan so'ng darhol PCR tajribasi uchun Real Time PCR tizimidan foydalaning va uni uzoq vaqt davomida chetga surib qo'ymang.

    4. PCR kuchaytirish shartlari mos emas va primer ketma-ketligi yoki konsentratsiyasi noto'g'ri.
    Taklif: primer ketma-ketligining to'g'riligini tasdiqlang va primer buzilmagan;agar kuchaytirish signali yaxshi bo'lmasa, tavlanish haroratini pasaytirishga harakat qiling va primer konsentratsiyasini mos ravishda moslashtiring.

    5. PCR tizimi noto'g'ri yoki tizim juda kichik.
    Taklif: PCR reaktsiya tizimi juda kichik bo'lsa, aniqlash aniqligi pasayadi.Real Time PCR tajribasini qayta o'tkazish uchun miqdoriy PCR asbobi tomonidan tavsiya etilgan reaksiya tizimidan foydalanish yaxshidir.

    Xabaringizni shu yerga yozing va bizga yuboring

    Bog'liqMahsulotlar

    Qidirish uchun Enter tugmasini yoki yopish uchun ESC tugmasini bosing