• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Foreasy Taq DNK polimeraza

To'plam tavsifi:

Yuqori o'ziga xoslik: ferment ma'lum bir issiq boshlash faolligiga ega.

Tez kuchaytirish: 10 sek/kb.

Yuqori darajada moslashuvchan shablon: GCni samarali kuchaytirish uchun ishlatilishi mumkin Yuqori qiymatli, turli xil kuchaytirish qiyin bo'lgan DNK shablonlari.

Kuchli sodiqlik: oddiy Taq fermenti 6 marta.

Kuchli termal barqarorlik: Bir hafta davomida 37 °C da joylashtirilishi mumkin va 90% dan ortiq faollikni saqlaydi.

oldingi kuch


Mahsulot detali

Mahsulot teglari

TSS

Tavsif

Foreasy Taq DNK polimeraza gen rekombinatsiyasi texnologiyasi orqali Escherichia coli muhandislik bakteriyalarida ifodalangan yangi Taq fermentidir.Fermentning o'zi ma'lum bir issiq boshlash faolligiga ega va an'anaviy PCR va qPCR uchun ishlatilishi mumkin;u 5'→3' DNK polimeraza faolligi va 5'→3' ekzonukleaza faolligiga ega, lekin 3'→5' ekzonukleaza faolligi yo'q.

To'plam komponentlari

Komponent

IM-01011 IM-01012 IM-01013
Foreasy Taq DNK polimeraza(5 U/mkl)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2 × Taq reaktsiyasi buferi  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Xususiyatlari va afzalliklari

- Yuqori o'ziga xoslik: ferment ma'lum bir issiq boshlash faolligiga ega.

- Tez kuchaytirish: 10 sek/kb.

- Yuqori darajada moslashuvchan shablon: GCni samarali kuchaytirish uchun ishlatilishi mumkin Yuqori qiymatli, turli xil kuchaytirish qiyin bo'lgan DNK shablonlari.

- Kuchli sodiqlik: oddiy Taq fermenti 6 marta.

- Kuchli termal barqarorlik: U bir hafta davomida 37 °C da joylashtirilishi mumkin va 90% dan ortiq faollikni saqlaydi.

Kit ilovasi

Turli xil PCR/qPCR tizimlari va to'g'ridan-to'g'ri PCR tizimlari

DNK parchalarini PCR bilan kuchaytirish

DNK belgilari

DNK ketma-ketligi

PCR A-dumli

U ta'rifi

1U: 74°C da 30 daqiqa davomida shablon/primer sifatida faollashtirilgan qizil ikra sperma DNKsi yordamida kislotada erimaydigan moddaga 10 nmol deoksinukleotidlarni kiritish uchun zarur bo'lgan ferment miqdori.

Reaktsiya holati

Harorat Vaqt Velosiped
37°C 5 daqiqa 1
94°C 5 daqiqa 1
94°C 10 soniya  

35

60°C 10 soniya
72°C 20 sek/kb
72°C 2 daqiqa 1

Saqlash

2 yil davomida -20 ± 5 ° C yoki uzoq muddatli saqlash uchun -80 ° C da.


  • Oldingi:
  • Keyingisi:

  • Kuchaytirish signallari yo'q

    1.To'plamdagi Taq DNK polimeraza noto'g'ri saqlanishi yoki to'plamning amal qilish muddati tugashi tufayli o'z faoliyatini yo'qotadi.
    Tavsiya: to'plamni saqlash shartlarini tasdiqlang;PCR tizimiga tegishli miqdorda Taq DNK polimerazasini qayta qo'shing yoki tegishli tajribalar uchun yangi Real Time PCR to'plamini sotib oling.

    2.DNK shablonida Taq DNK polimeraza ingibitorlari ko'p.
    Taklif: Shablonni yangilang yoki ishlatiladigan shablon miqdorini kamaytiring.

    3.Mg2+ konsentratsiyasi mos emas.
    Tavsiya: Biz taqdim etayotgan 2× Real PCR aralashmasining Mg2+ konsentratsiyasi 3,5 mM.Biroq, ba'zi maxsus primerlar va shablonlar uchun Mg2 + kontsentratsiyasi yuqori bo'lishi mumkin.Shuning uchun Mg2+ konsentratsiyasini optimallashtirish uchun to'g'ridan-to'g'ri MgCl2 qo'shishingiz mumkin.Optimallashtirish uchun har safar Mg2+ 0,5 mM ni oshirish tavsiya etiladi.

    4. PCR kuchaytirish shartlari mos emas va primer ketma-ketligi yoki konsentratsiyasi noto'g'ri.
    Taklif: primer ketma-ketligining to'g'riligini tasdiqlang va primer buzilmagan;agar kuchaytirish signali yaxshi bo'lmasa, tavlanish haroratini pasaytirishga harakat qiling va primer konsentratsiyasini mos ravishda moslashtiring.

    5. Shablon miqdori juda oz yoki juda ko'p.
    Tavsiya: Shablonni linearizatsiya gradientini suyultirishni amalga oshiring va Real Time PCR tajribasi uchun eng yaxshi PCR effekti bilan shablon konsentratsiyasini tanlang.

    NTC juda yuqori floresans qiymatiga ega

    1.Ishlash jarayonida yuzaga kelgan reagentning ifloslanishi.
    Tavsiya: Real Time PCR tajribalari uchun yangi reagentlar bilan almashtiring.

    2.PZR reaktsiya tizimini tayyorlash jarayonida kontaminatsiya sodir bo'ldi.
    Tavsiya: Ish paytida zaruriy himoya choralarini ko'ring, masalan: lateks qo'lqop kiyish, filtrli pipetka uchidan foydalanish va hokazo.

    3. Primerlar buziladi va primerlarning degradatsiyasi o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirilishiga olib keladi.
    Taklif: SDS-PAGE elektroforezidan foydalanib, primerlar degradatsiyaga uchragan yoki yo'qligini aniqlang va ularni Real Time PCR tajribalari uchun yangi primerlar bilan almashtiring.

    Primer dimer yoki o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirish

    1.Mg2+ konsentratsiyasi mos emas.
    Tavsiya: Biz taqdim etayotgan 2× Real PCR EasyTM Mixning Mg2+ konsentratsiyasi 3,5 mM.Biroq, ba'zi maxsus primerlar va shablonlar uchun Mg2 + kontsentratsiyasi yuqori bo'lishi mumkin.Shuning uchun Mg2+ konsentratsiyasini optimallashtirish uchun to'g'ridan-to'g'ri MgCl2 qo'shishingiz mumkin.Optimallashtirish uchun har safar Mg2+ 0,5 mM ni oshirish tavsiya etiladi.

    2. PCR tavlanish harorati juda past.
    Taklif: PCR tavlanish haroratini har safar 1 ℃ yoki 2 ℃ ga oshiring.

    3. PCR mahsuloti juda uzun.
    Tavsiya: Real Time PCR mahsulotining uzunligi 100-150bp orasida, 500bp dan oshmasligi kerak.

    4. Primerlar buziladi va primerlarning degradatsiyasi o'ziga xos kuchaytirishning paydo bo'lishiga olib keladi.
    Taklif: SDS-PAGE elektroforezidan foydalanib, primerlar degradatsiyaga uchragan yoki yo'qligini aniqlang va ularni Real Time PCR tajribalari uchun yangi primerlar bilan almashtiring.

    5. PCR tizimi noto'g'ri yoki tizim juda kichik.
    Taklif: PCR reaktsiya tizimi juda kichik bo'lsa, aniqlash aniqligi pasayadi.Real Time PCR tajribasini qayta o'tkazish uchun miqdoriy PCR asbobi tomonidan tavsiya etilgan reaksiya tizimidan foydalanish yaxshidir.

    Miqdoriy qiymatlarning yomon takrorlanishi

    1. Asbob noto'g'ri ishlayapti.
    Taklif: Asbobning har bir PCR teshigi o'rtasida xatolar bo'lishi mumkin, bu esa haroratni boshqarish yoki aniqlashda yomon takrorlanishga olib keladi.Iltimos, tegishli asbobning ko'rsatmalariga muvofiq tekshiring.

    2.Namunaning tozaligi yaxshi emas.
    Tavsiya: Nopok namunalar shablon va primerlarning tozaligini o'z ichiga olgan tajribaning yomon takrorlanishiga olib keladi.Shablonni qayta tozalash eng yaxshisidir va primerlar SDS-PAGE orqali eng yaxshi tozalanadi.

    3. PCR tizimini tayyorlash va saqlash muddati juda uzoq.
    Taklif: Tayyorgarlikdan so'ng darhol PCR tajribasi uchun Real Time PCR tizimidan foydalaning va uni uzoq vaqt davomida chetga surib qo'ymang.

    4. PCR kuchaytirish shartlari mos emas va primer ketma-ketligi yoki konsentratsiyasi noto'g'ri.
    Taklif: primer ketma-ketligining to'g'riligini tasdiqlang va primer buzilmagan;agar kuchaytirish signali yaxshi bo'lmasa, tavlanish haroratini pasaytirishga harakat qiling va primer konsentratsiyasini mos ravishda moslashtiring.

    5. PCR tizimi noto'g'ri yoki tizim juda kichik.
    Taklif: PCR reaktsiya tizimi juda kichik bo'lsa, aniqlash aniqligi pasayadi.Real Time PCR tajribasini qayta o'tkazish uchun miqdoriy PCR asbobi tomonidan tavsiya etilgan reaksiya tizimidan foydalanish yaxshidir.

    Xabaringizni shu yerga yozing va bizga yuboring