ForeDirect RT-qPCR to'plami
To'plam tavsifi:
◮RNKni tozalash jarayonlarisiz tampon to'plamlaridan RNKni to'g'ridan-to'g'ri real vaqtda kuchaytirish uchun.Ushbu to'plam qRT-PCR sikllarini bir soat ichida yakunlaydi.Ferment aralashmasi teskari transkriptaza, Hot-Start Taq DNK polimeraza, RNase inhibitori optimallashtirilgan aralashmasidir.Reaktsiya buferi barcha kerakli komponentlarni, jumladan optimallashtirilgan bufer komponentlarini, Mg2+, dUTP va dNTP.
Tavsif
ForeDirect RT-qPCR to'plami RNKni tozalash jarayonlarisiz tampon to'plamlaridan RNKni bevosita real vaqtda kuchaytirish uchun mo'ljallangan.Ushbu to'plam qRT-PCR sikllarini bir soat ichida yakunlaydi.Ferment aralashmasi teskari transkriptaza, Hot-Start Taq DNK polimeraza, RNase inhibitori optimallashtirilgan aralashmasidir.Reaktsiya buferi barcha kerakli komponentlarni, jumladan optimallashtirilgan bufer komponentlarini, Mg2+, dUTP va dNTP.
Texnik xususiyatlari
100T
To'plam komponentlari
| Nuklein kislotani ajratuvchi vosita |
| RNK himoyachisi |
| 2 × RT-qPCR buferi |
| Ferment aralashmasi (Taq&M-MLV) |
| Ko'rsatmalar |
PCR dasturi
1. PCR reaksiya naychalari qisqa muddatga santrifüj qilingandan so'ng, ularni kuchaytiruvchi asbobning namuna idishiga joylashtiring.
2. Issiqlik protokoli
| Qadam | Harorat | Vaqt | Velosipedlar | |
| 1 | Teskari transkripsiya | 50℃ | 15 daqiqa | 1 |
| 2 | Oldindan denaturatsiya | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturatsiya | 95℃ | 10 soniya | 42 |
| 4 | Anal / Kengaytma | 60℃ | 30 soniya | |
Eslatma:Floresan signali har bir tsiklning kengaytma bosqichidan so'ng darhol aniqlandi.
3. Sozlagandan so'ng faylni saqlang va reaktsiya dasturini ishga tushiring.
Operatsion bosqichlari
Reaktivni tayyorlashdan oldin, to'plamdagi barcha reagentlarni xona haroratida eritib, muloyimlik bilan aralashtirish kerak.
Reaktiv tayyorlash
1. Nuklein kislotasi ajralib chiqadigan aralashmani tayyorlang
| Komponent | Namuna yoki nazorat uchun hajm |
| Nuklein kislotani ajratuvchi vosita | 5 mkl |
| RNK himoyachisi | 0,5 mkl |
2. Reaktsiya aralashmasini tayyorlang
| Komponent | Namuna yoki nazorat uchun hajm |
| 2 × RT-qPCR buferi | 15 mkl |
| Ferment aralashmasi (Taq&M-MLV) | 1,5 mkl |
| Primerlar va problar | 1 mkl |
Saqlash va saqlash muddati
-To'plam -20 da saqlanishi kerak± 5℃.Amal qilish muddati 12 oy.
- Muzlatish-eritish davrlarini takrorlashdan saqlaning (<5 sikl).
